亚洲综合在线播放_久久视频免费在线_久久久黄色av_亚洲免费视频一区

脲和鹽酸胍在包涵體蛋白質(zhì)提純中的作用續(xù)

在變性液中需加入還原劑，如2－巰基乙醇(β-ME)、二硫蘇糖醇（DTT）、二硫赤蘚糖醇、還原型的谷胱甘肽（GST）、半胱氨酸。還原劑的使用濃度一般是50-100mMβ-ME或DTT，也有文獻(xiàn)使用5mM濃度。還原劑的使用濃度與蛋白二硫鍵的數(shù)目無關(guān)，而有些沒有二硫鍵的蛋白加不加Chemicalbook還原劑無影響，如牛生長包涵體的增溶。對于目標(biāo)蛋白沒有二硫鍵某些包涵體的增溶，有時(shí)還原劑的使用也是必要的，可能由于含二硫鍵的雜蛋白影響了包涵體的溶解。同時(shí)還需加入金屬鰲合劑如EDTA或EGTA，以鰲合Cu2+、Fe2+等金屬離子，防止已經(jīng)處于還原狀態(tài)的巰基與之發(fā)生氧化反應(yīng)。變性劑溶解后，蛋白質(zhì)失去了生物學(xué)活性。