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成都拮抗凋亡轉錄因子抗體
成都拮抗凋亡轉錄因子抗體 價格:  元(人民幣) 產地:美國
最少起訂量:1 發貨地:本地至全國
上架時間:2019-10-14 15:27:32 瀏覽量:79
上海勁馬實驗設備有限公司  
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 一、產品資料

產品名稱:拮抗凋亡轉錄因子抗體

產品類型:一抗

產品規格:0.2ml/0.1ml

產品應用:科研

產品商標:Abcam

作用:指機體的免疫系統在抗原刺激下,由B淋巴細胞分化成的漿細胞所產生的、可與相應抗原發生特異性結合反應的免疫球蛋白。產品低溫保存。

抗體來源:詳詢種屬

適應物種:可提供抗體的各種標記

產品價格:優惠價格來電咨詢

詳細資料:參考產品詳詢說明

產品簡介:

抗體:是高等動物在抗原物質的刺激下由漿細胞產生的一類能與相應抗原發生特異性結合的免疫球蛋白。抗體通常存在于血清和淋巴(組織液)中。

單克隆及多克隆抗體:由單一克隆的細胞(通常是單一克隆的雜交瘤細胞)所產生的識別某一抗原表位的單一抗體;多克隆抗體是由多種細胞分別接觸相應抗原而產生的多種抗體的總和,多克隆抗體識別抗原的多個表位。

抗體結構:抗體是由四條肽鏈構成的“Y”形對稱的分子,包括兩條重鏈和兩條輕鏈。在“Y”的尖端部位的氨基酸順序在不同的抗體分子中差別很大,是負責與抗原進行特異性結合的區域,稱為可變區,余下的區域則稱為恒定區。

 

二、抗體分類

抗體分類:根據重鏈恒定區的血清學類型,可將抗體分為IgM,IgG,IgA,IgD,IgE五類,它們的重鏈分別為mu, gamma, alpha, delta, epsilon鏈。在上述每一類別中,按重鏈構造上的變異又可分為幾個亞類,例如人的IgG可分為IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四個亞類。

輕鏈分為兩種類型,kappa鏈和lambda鏈,但每種抗體中只存在一種類型的輕鏈。

二抗:二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標簽。由于二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛,如western blot(通過與特異性抗體結合來鑒定蛋白質),ELISA(以耦聯有酶的抗體或抗原為標記來檢測特異性的蛋白質,尤其是相應的抗原或抗體),免疫組織化學(檢測組織中的特異性抗原),免疫細胞化學(通過免疫學方法檢測細胞的抗原組成),流式細胞術(通過檢測激光所激發熒光來鑒定分離不同類型的細胞)及免疫沉淀(通過抗原與抗體的特異性結合作用來分離相應抗原)。二抗針對某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性,因而使用標記的二抗可以免去對每一個一抗進行標記,大大節省了時間和費用;此外,一個一抗分子可以同時結合幾個二抗分子,從而使信號大大增強,提高了實驗靈敏度。


三、操作流程

染色質免疫沉淀的流程示意圖

染色質免疫沉淀

染色質免疫沉淀(CHIP)最初是在20世紀80年代研究RNA聚合酶II與靶基因相互作用的過程中發展起來的 [1] 。在此過程中,細胞被固定在甲醛或類似的固定劑中以使細胞DNA和相關蛋白分子發生交聯。固定的細胞隨后經超聲處理,使細胞中的DNA-蛋白質復合物斷裂為100-300 bp的片段,然后用結合在DNA上的特異性蛋白(如組蛋白和轉錄因子)的抗體,按照標準方法免疫沉淀相關的DNA片段。最后,通過去交聯分離DNA-蛋白復合物,再行PCR分析結合在蛋白上的DNA片段。理想情況下,標準的CHIP法是用來驗證某個蛋白和某個假定的靶基因之間的相互作用,因為要根據假定的靶基因序列設計特異性PCR引物(圖7)。

CHIP法有個局限性,即交聯步驟可能會破壞蛋白分子結構,從而阻礙抗體與其結合,影響后續的免疫沉淀。此時,可以嘗試無交聯步驟的CHIP法;此過程稱為N-ChIP的免疫沉淀法 [1, 2] 。盡管去交聯提高抗原識別能力,但是一般只適用于目標蛋白強烈地結合在DNA上這種情況。

最近,芯片被改良以用于高通量分析。例如,ChIP-on-Chip結合了CHIP法和微陣列技術,適用于熒光標記序列的全基因組篩選。在這些檢測中,用不同的熒光染料標記沉淀組DNA和對照組DNA(通常不經沉淀的總輸入),然后用各組DNA與DNA微陣列芯片甚至整個基因組小寡核苷酸進行雜交。通過標準化分析技術,可以從芯片獲得CHIP樣品相對于DNA對照組的DNA結合位點的詳細信息。

染色質免疫共沉淀測序

將染色質沉淀技術與現代高通量測序技術相結合,從而有利于鑒定前所未知的靶基因序列。由于高通量測序可以鑒定和提供大量的基因組信息,因此染色質免疫共沉淀測序適用于整個基因組的染色質免疫沉淀檢測 [3] 。

類似于染色質免疫沉淀技術用來分析DNA-蛋白質的相互作用,交聯免疫沉淀技術可用于分析RNA-蛋白質的相互作用[4] 。染色質免疫共沉淀測序的方法的類似于染色質免疫沉淀;然而,因為目標核酸不同,因此也存在幾個明顯的差異。在染色質免疫共沉淀測序中,推薦使用的交聯劑是紫外線照射。由于轉錄組RNA一般較短,所以不需要經過超聲處理,細胞可以在標準緩沖液中裂解。但是必須在所有的裂解產物中添加RNase抑制劑以防止目標RNA的降解 [5]。


四、儲存方式

保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

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