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侖昌碩生物? 人組織蛋白酶K（Cath-K）elisa試劑盒???

廈門侖昌碩生物科技有限公司集研發、生產、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術公司，目前可提供各種抗體、免疫學相關的檢測試劑盒、胎牛血清，動物抗血清等高品質產品及服務，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。公司非常注重企業信息化的建設及企業平臺的建設，我們內部采用了先進的信息處理平臺，保證客戶的需求可以準確、有效處理。公司成立之初，立足外貿，和部分歐美及亞非國的客戶建立了良好的合作，隨著國內生物領域的蓬勃發展，逐步把重心轉移到國內來，為每位科研人員獻上高品質的產品及服務是我們的使命。

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?1. 包被抗原：用包被液將抗原作適當稀釋, 一般為1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃溫育1小時后，4℃冰箱放置16～18小時。

?2. 洗滌：倒盡板孔中液體，加滿洗滌液，靜放三分鐘，反復三次，將反應板顛倒在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡。

3. 加封閉液200微升，37℃放置一小時。

4. 洗滌同2。

5. 加被檢血清：用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,，每孔200微升。同時作稀釋液對照。37℃放置2小時。

6. 洗滌同2。

7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時。

8. 洗滌同2。

9. 加底物：鄰*二胺溶液加200ml，室溫暗處10--15分鐘。

10. 加終止液：每孔50微升。

11. 觀察結果：用酶聯免疫檢測儀記錄450nm讀數。

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背景:一些實驗已經證明在同一載體上構建含多個基因的共表達載體,可提高轉染和表達效率.目的:利用多形上皮黏蛋白(polymorphic epithelial mucin,MUC1)多肽骨架中含有許多連續重復系列,構建人MUC1重復序列串聯體基因與巨噬細胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony sfimulating factor,GM-CSF)基因重組的真核共表達質粒pcDNA3.1( ).MUCI-GM-CSF,并觀察重組質粒存COS-7細胞中的表達.設計、時間及地點:基因重組體設計實驗,于2005-09/2006-12在解放軍第四軍醫大學動物中心實驗室完成.材料:真核表達載體pcDNA3.1( )由英國Taylor-Papadimitriou 教授惠贈.pGEM.3zf(-)-GM-CSF質粒、COS-7細胞、pUC18載體及E.coli DH5 α為自備,雌性BALB/c小鼠由解放軍第四軍醫大學實驗動物中心提供.方法:將信號肽及編碼MUC1基因片段合成、合成的片斷經退火等方法獲得MUC1基因重復序列串聯體,酶切鑒定及序列分析后,與GM-CSF基因克隆入pcDNA3.1( )真核表達載體中,構建真核共表達質粒pcDNA3.1( )-MUC1-GM-CSF.以重組質粒轉染COS-7細胞.主要觀察指標:通過間接免疫熒光法及ELISA檢測目的基因的表達.結果:酶切鑒定及序列分析表明,重組質粒含有人MUC1重復序列串聯體與GM-CSF的融合基因,在COS-7細胞中可檢測到MUC1表達,重組質粒免疫小鼠可誘導產牛抗GM-CSF抗體.結論:成功構建了人MUC1基因重復序列串聯體與免疫佐劑GM-CSF基因重組成為雙基因多表位抗原的真核共表達質粒.

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??廈門侖昌碩生物科技有限公司 本公司集研發、生產、銷售、服務及品牌代理為體的生物技術公司，目可提供各種抗體、免疫學相關的檢測試劑盒、胎牛血清、動物抗血清等高品質產品及服務，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學域。公司非常注重企業信息化的建設及企業平臺的建設，我們內部采用了先進的信息處理平臺，保證客戶的需求可以準確、有效處理。公司成立之初，立足外貿，和部分歐美及亞非國家的客戶建立了良好的合作，隨著國內生物域的蓬勃發展，逐步把重心轉移到國內來，為每位科研人員獻上高品質的產品及服務是我們的使命。

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