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侖昌碩生物????小鼠干擾素誘導T細胞趨化因子（ITAC;CXCL11）elisa試劑盒

? ? ? ? ? ? ? ?目的 構建載有小鼠抵抗素(resistin)基因及其反義核酸的重組真核表達質粒,為下一步進行resistin生物功能研究打基礎.方法 用resistin基因mRNA編碼區序列特異引物,從小鼠脂肪組織中,通過RT-PCR的方法合成resistin cDNA,T4DNA連接酶將resistin cDNA克隆于pGEM-T栽體,經雙酶切及測序鑒定克隆成功后再亞克隆于pcDNA3.1( )或pcDNA3.1(-)真核表達栽體,并測序鑒定.結 果 PCR產物長度與resistin cDNA理論長度363 bp相符:重組pGEM-T被EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ內切酶切為約3000 bp和355 bp兩個片段,測序結果表明插入pGEM-T的DNA片段的核苷酸序列與小鼠resisdn基因mRNA編碼區序列完全一致.重組pcDNA3.1( ) 和pcDNA3.1(-)測序結果表明插入的DNA片段分別與小鼠resistin基因mRNA編碼區序列和反義resistin基因mRNA編碼區核苷 酸序列一致.結論 成功克隆載有resistin基因和載有resistin基因反義核酸的重組真核表達質粒.

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?心血管疾病作為當今世界上患病率和死亡率最高的疾病,長期以來受到研究人員的廣泛關注.而其中高血壓是心血管疾病最重要的危險因素之一.許多臨床試驗顯示,糖尿病患者較正常人群具有較高心血管疾病患病率.同時分子生物學研究也證實,Ⅱ型糖尿病和心血管疾病之間存在著密切的聯系.抵抗素Resistin作為在胰島素抵抗發生過程中的重要脂肪因子,被發現在高血壓以及其他一些心血管疾病患者血清內具有較高的水平,成為研究糖尿病和心血管疾病之間相互關系的重要因子之一.近些年越來越多的研究表明,Resistin同炎癥狀態下的動脈粥樣硬化,胰島素抵抗狀態下胰島素調節血管舒張能力受損以及內皮細胞功能紊亂等等都有著密切的關系.但是關于Resistin同高血壓之間的關系以及相關的分子機理的直接研究并不是很多.本實驗利用小鼠無創血壓儀對鼠尾血壓進行測量證實Resistin連續處理6天可以引起小鼠體內高血壓以及胰島素抵抗.隨后通過TLR4敲除模式小鼠,以及血管緊張素轉化酶(ACE)抑制劑培哚普利進行小鼠灌胃,利用RT-PCR,ELISA,ChIP等實驗技術對Resistin誘導小鼠高血壓的分子機理進行探索.同時結合正常人群,糖尿病,高血壓以及糖尿病兼高血壓患者的血清檢驗進一步探討Resistin同糖尿病,高血壓之間的關系.

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