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? ? ? ? ? ? ? ?目的:Ⅰ型變態反應疾病是一類由IgE介導的過敏性疾病,主要包括支氣管,鼻炎,結膜炎等疾病.主要表現為大量表達Th2細胞因子,嗜酸粒細胞和肥大細胞浸潤,同時引發炎性反應.近年來Ⅰ型變態反應性疾病的發病率明顯升高,其受重視程度日益增強.Ⅰ型變態反應疾病是一種需要從多角度多層面綜合性治療的疾病,而現階段對其尚沒有完善治療方法,它已成為一個全球性健康問題.近期大量研究發現肥大細胞在Ⅰ型變態反應性炎癥發病機制的過程中貫穿始終,起核心作用.肥大細胞是速發型過敏反應的初級效應細胞,其激活直接影響次級效應細胞—嗜酸性粒細胞和中性粒細胞的募集和激活,是重要的調節性免疫細胞,是介導速發型過敏和炎癥的重要樞紐,能引發和擴大炎癥反應.同時,肥大細胞還參與了許多疾病和炎癥過程,特別是與一些變態反應性疾病如蕁麻疹,銀屑病和系統性紅斑狼瘡的發生關系密切.但是對于肥大細胞活化的確切機制尚不清楚,調控肥大細胞活化的也大細胞活化初始階段的三種關鍵酪氨酸激蛋白酶(Lyn,Syk,Fyn)的膜轉移以及化的過程.3飽和滅菌水抑制肥大細胞活化的下游通路PI3K-AKT分子信號轉導通路的激活綜上所述,飽和滅菌水抑制了Anti-DNP-IgE誘導的肥大細胞活化,其機制有可能是通過調控肥大細胞活化初始階段三種酪氨酸激蛋白酶(Lyn,Syk,Fyn),繼而抑制了下游PI3K-AKT信號轉導通路的激活而實現的.

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?目的:探討鈣結合蛋白S100A4調節小鼠源肥大細胞(BMMC)活化的作用.方法:8~10周齡野生型(WT)和S100A4基因敲除(S100A4-/-) C57BL/6健康雄性小鼠各2只,取脛骨與股骨提取進行源肥大細胞(BMMC)培養并鑒定;以成熟WT BMMC為模型細胞,實驗分為S100A4蛋白處理組(1 500μg/L S100A4蛋白)和鹽緩沖液(PBS)對照組(S100A4蛋白等量體積PBS),分別于培養第1,2及3周采用甲苯胺藍染色鑒定小鼠成熟BMMC,采用化學發光法檢測各組小鼠成熟BMMC中β-氨基己糖苷酶(β-hex)的吸光度(OD),采用流式細胞術檢測各組小鼠成熟BMMC的S100A4蛋白表達和白細胞介素-5(IL-5),白細胞介素-6(IL-6),白細胞介素-13(IL-13)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的熒光強度并計算相對熒光指數(r FI);以成熟WT和S100A4-/-BMMC為模型細胞,實驗分為WT離子霉素(ION)處理組(1 500μg/L ION),WT PBS對照組(ION等量體積PBS),S100A4-/-ION處理組(1 500μg/L ION)及S100A4-/-PBS對照組(ION等量體積PBS),采用化學發光法檢測各組小鼠成熟BMMC中平均低于WT ION處理組(P <0. 05).結論:S100A4蛋白能夠直接誘導成熟BMMC活化,S100A4基因的缺失可抑制成熟BMMC活化及炎性因子的產生.

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