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侖昌碩生物 ? ???大鼠心肌肌凝蛋白抗體（AcMA）elisa試劑盒

? ?背景及目的: 代謝綜合征(Metabolic syndrome,Mets)的主要特點(diǎn)是胰島素抵抗,高血壓,中心型肥胖及高脂血癥,其發(fā)病率逐年升高且發(fā)病年齡趨于年輕化;代謝綜合征患者發(fā)生血栓栓塞性疾病及相關(guān)并發(fā)癥的概率明顯高于正常人群,但其具體發(fā)病機(jī)制尚未明確.代謝綜合征患者體內(nèi)抵抗素(Resistin,Re)水平明顯升高.本課題組前期在體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肥胖小鼠體內(nèi)抵抗素水平升高,升高的抵抗素可促進(jìn)小鼠靜脈血栓的形成,同時(shí)肥胖大鼠體內(nèi)纖溶酶原激活劑抑制物-1(Plasminogen activator inhibitor1,PAI-1)水平也升高.緊接著本課題組前期體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)抵抗素能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞PAI-1表達(dá)水平的升高.因此,綜合體內(nèi)外實(shí)驗(yàn),我們推測(cè)抵抗素促進(jìn)血栓形成的過(guò)程可能與PAI-1有一定的關(guān)系.本研究通過(guò)PAI-1單克隆抗體(PAI-1Ab)抑制PAI-1蛋白活性,觀察外源性抵抗素作用后血栓的變化情況,直接驗(yàn)證PAI-1在抵抗素促進(jìn)小鼠靜脈血栓形成中的作用. )抵抗素組大鼠下腔靜脈PAI-1mRNA表達(dá)水平高于鹽水組(P<0.01),抵抗素 PAI-1Ab組大鼠下腔靜脈PAI-1mRNA表達(dá)水平高于鹽水 PAI-1Ab組(P<0.01). (5)抵抗素組大鼠下腔靜脈血栓內(nèi)纖維蛋白含量明顯多于鹽水組,抵抗素 PAI-1Ab組大鼠下腔靜脈血栓內(nèi)纖維蛋白含量明顯少于抵抗素組,鹽水 PAI-1Ab組血栓纖維蛋白含量少于鹽水組. 結(jié)論: 抵抗素可增加大鼠深靜脈血栓重量及長(zhǎng)度,促進(jìn)血栓形成.抵抗素可升高大鼠下腔靜脈內(nèi)皮PAI-1mRNA及血漿PAI-1蛋白水平.抑制PAI-1可減弱抵抗素的促進(jìn)深靜脈血栓形成作用,提示抵抗素促進(jìn)血栓形成部分是通過(guò)PAI-1發(fā)揮作用

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1. 包被抗原：用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為1～10微克/孔，每孔加200微升，37℃溫育1小時(shí)后，4℃冰箱放置16～18小時(shí)。

?2. 洗滌：倒盡板孔中液體，加滿(mǎn)洗滌液，靜放三分鐘，反復(fù)三次，將反應(yīng)板顛倒在吸水紙上，使孔中洗滌液流盡。

3. 加封閉液200微升，37℃放置一小時(shí)。

4. 洗滌同2。

5. 加被檢血清：用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,，每孔200微升。同時(shí)作稀釋液對(duì)照。37℃放置2小時(shí)。

6. 洗滌同2。

7. 加辣根過(guò)氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時(shí)。

8. 洗滌同2。

9. 加底物：鄰*二胺溶液加200ml，室溫暗處10--15分鐘。

10. 加終止液：每孔50微升。

11. 觀察結(jié)果：用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀記錄450nm讀數(shù)。

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心血管疾病作為當(dāng)今世界上患病率和死亡率高的疾病,長(zhǎng)期以來(lái)受到研究人員的廣泛關(guān)注.而其中高血壓是心血管疾病重要的危險(xiǎn)因素之一.許多臨床試驗(yàn)顯示,糖尿病患者較正常人群具有較高心血管疾病患病率.同時(shí)分子生物學(xué)研究也證實(shí),Ⅱ型糖尿病和心血管疾病之間存在著密切的聯(lián)系.抵抗素Resistin作為在胰島素抵抗發(fā)生過(guò)程中的重要脂肪因子,被發(fā)現(xiàn)在高血壓以及其他一些心血管疾病患者血清內(nèi)具有較高的水平,成為研究糖尿病和心血管疾病之間相互關(guān)系的重要因子之一.近些年越來(lái)越多的研究表明,Resistin同炎癥狀態(tài)下的動(dòng)脈粥樣硬化,胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下胰島素調(diào)節(jié)血管舒張能力受損以及內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂等等都有著密切的關(guān)系.但是關(guān)于Resistin同高血壓之間的關(guān)系以及相關(guān)的分子機(jī)理的直接研究并不是很多.本實(shí)驗(yàn)利用小鼠無(wú)創(chuàng)血壓儀對(duì)鼠尾血壓進(jìn)行測(cè)量證實(shí)Resistin連續(xù)處理6天可以引起小鼠體內(nèi)高血壓以及胰島素抵抗.隨后通過(guò)TLR4敲除模式小鼠,以及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑培哚普利進(jìn)行小鼠灌胃,利用RT-PCR,ELISA,ChIP等實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)Resistin誘導(dǎo)小鼠高血壓的分子機(jī)理進(jìn)行探索.同時(shí)結(jié)合正常人群,糖尿病,高血壓以及糖尿病兼高血壓患者的血清檢驗(yàn)進(jìn)一步探討Resistin同糖尿病,高血壓之間的關(guān)系.

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? 廈門(mén)侖昌碩生物科技有限公司集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)及品牌代理為體的生物技術(shù)公司，目可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測(cè)試劑盒、胎牛血清、動(dòng)物抗血清等品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)域。公司非常注重企業(yè)信息化的建設(shè)及企業(yè)平臺(tái)的建設(shè)，我們內(nèi)部采用了先進(jìn)的信息處理平臺(tái)，保證客戶(hù)的需求可以準(zhǔn)確、處理。公司成立之初，立足外貿(mào)，和部分歐美及亞非國(guó)家的客戶(hù)建立了良好的合作，隨著國(guó)內(nèi)生物域的蓬勃發(fā)展，逐步把重心轉(zhuǎn)移到國(guó)內(nèi)來(lái)，為每位科研人員獻(xiàn)上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。

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